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CRISPR那些事儿
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FAQ
如何证明无需筛选仍能取得高编辑效率?
本产品已在多个细胞上验证,RNP系统在转染后4小时内即进入细胞发挥作用,Cas9蛋白在24-48小时降解,顺利获得瞬时高效表达实现编辑,无需持续筛选。
为何对细胞的损伤比较小?
本产品采用先进的生物分子转染技术,相比传统化学转染法的毒性及电转法的物理冲击,具有显著优势。
能否在悬浮细胞中达到相同效率?
通常而言,悬浮细胞转染难度相对较大。然而,本产品凭借卓越性能,不仅适用于贴壁细胞,在悬浮细胞中同样表现出色。以 Jurkat 细胞为例,转染 48h 后即可实现高达 97% 的编辑效率,充分彰显了本产品在悬浮细胞转染方面的高效率优势,可充分满足您对悬浮细胞转染的高标准需求。
若使用试剂盒敲除失败,该如何处理?
使用本试剂盒进行基因敲除时,若出现敲除失败的情况,EVO视讯 EVO真人生命基因将不收取试剂盒费用,同时,您所支付的试剂盒费用可直接转为EVO视讯 EVO真人生命基因给予的基因敲除服务费用,确保您在基因编辑实验中无后顾之忧。
样本反复检测结果不符
PCR法检测支原体较为灵敏,应注意样本间的交叉污染,取样时,在无菌条件下单独取样每个样品,进行样本处理、PCR反应后,待样本冷却再进行下一步操作,避免气溶胶污染样。
阴性对照出现条带
更换新启用的阴性标品进行复核,注意点样时更换枪头、点样优先阴性及阴性标品存放,避免样品间的交叉污染。
是否可用于试剂的支原体检测
对于常用的细胞培养试剂,如培养基、血清等,本试剂盒可检测支原体,检测时无需进行样本制备,直接进行PCR反应后点样即可;对于DMSO、乙醇等有机溶剂,本试剂盒无法检测。
是否可以同时使用MYCE-A和MYCE-B处理细胞
不能同时使用,同时使用两种试剂会对细胞造成较大的压力,且更易产生耐药性,请按顺序交替使用两种试剂。
支原体清除导致细胞死亡或状态差
对于大部分细胞,经测试支原体清除无细胞状态上的影响,但对于存在的敏感细胞,建议清除支原体前备份细胞,在清除支原体时细胞死亡或状态差时,将工作浓度减半,周期增加一轮,即28 days。
是否可以与常规的抗生素和青霉素、链霉素、两性霉素、庆大霉素等混合使用
由于该试剂本身已具备常规抗生素的功能,且为了减少细胞生存压力,我们不建议在使用该试剂期间再使用其他的抗生素。
检测清除细胞仍存在支原体感染
顺利获得处理的细胞,绝大多数支原体应被清除殆尽,如遇减少但未被清除完全,可将工作浓度增加50%再处理1个周期。
是否可以同时使用MYCE-A和MYCE-B处理细胞
不能同时使用,同时使用两种试剂会对细胞造成较大的压力,且更易产生耐药性,请按顺序交替使用两种试剂。
支原体清除导致细胞死亡或状态差
对于大部分细胞,经测试支原体清除无细胞状态上的影响,但对于存在的敏感细胞,建议清除支原体前备份细胞,在清除支原体时细胞死亡或状态差时,将工作浓度减半,周期增加一轮,即28 days
是否可以与常规的抗生素和青霉素、链霉素、两性霉素、庆大霉素等混合使用
由于该试剂本身已具备常规抗生素的功能,且为了减少细胞生存压力,我们不建议在使用该试剂期间再使用其他的抗生素。
检测清除细胞仍存在支原体感染
顺利获得处理的细胞,绝大多数支原体应被清除殆尽,如遇减少但未被清除完全,可将工作浓度增加50%再处理1个周期。